更新時(shí)間:2022-05-04
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核糖核酸酶T1 | 9026-12-4
英文名稱 : Ribonulease T1 from Aspergillus oryzae
C A S : 9026-12-4
保 存 : -20℃
級(jí) 別 : BR
分子量 : 11.2kDa,單體
來 源 : 大腸桿菌細(xì)胞含有米曲霉(Aspergillus oryzae)來源的克隆基因rntA
濃 度 : 1000U/ul
活力定義 : 1個(gè)活性單位是指37℃,pH7.5條件下,酵母RNA溶解水解15分鐘使其260nm波長(zhǎng)吸光值增加1.0所需的酶量
酶活性分析混合物 : 50mM Tris-HCL(PH7.5), 2mM EDTA, 3mg/ml酵母RNA
保存緩沖液組分 : 50mM Tris-HCL(PH7.4)和50%(v/v)甘油
質(zhì)量控制 : 相關(guān)測(cè)試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、蛋白酶污染,功能檢測(cè)方法為質(zhì)粒DNA純化過程中的RNA降解(與RNase A協(xié)同作用)
抑制劑 : 金屬離子Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、Cu2+(MgCL2, 100mM濃度時(shí)抑制效率約40%;CaCL2,10mM濃度時(shí)抑制效率約30%;Zn2+、Fe2+和Cu2+在1mM時(shí)抑制效果很強(qiáng))、單核苷酸(2-GMP,3-GMP等)、guanilyl-2-5-鳥苷
失 活 : 熱失活是可逆的,建議采用過柱純化或苯-酚/氯仿抽提除去該酶
性 狀 : 核糖核酸酶 T1是一種內(nèi)切酶,在G殘基位點(diǎn)特異性降解單鏈RNA。該酶通過形成核苷2′,3′-環(huán)磷酸中間體來切割3′-鳥苷殘基與鄰近核苷5′-OH基團(tuán)之間的磷酸二酯鍵。反應(yīng)產(chǎn)物是3′-GMP末端寡核苷酸。RNase T1發(fā)揮活性無需金屬離子參與
用 途 : 生化研究。除去DNA抽取物中的RNA;RNA測(cè)序;核糖核酸酶保護(hù)分析,與RNase A協(xié)同作用;除去重組蛋白抽提物中的RNA;檢測(cè)G-less cassette DNA模板體外轉(zhuǎn)錄合成的RNA轉(zhuǎn)錄子水平
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