更多小鼠ELISA試劑盒
許多試劑檢測都涉及到標(biāo)準(zhǔn)曲線的問題,標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到小鼠核因子受體活化因子配基ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的成敗,那么究竟如何繪制或制作標(biāo)準(zhǔn)曲線呢?
【詳細(xì)說明】
小鼠組織因子Elisa試劑盒酶標(biāo)儀的使用注意事項(xiàng):
1.樣本名字文件設(shè)定 由于部分試驗(yàn)的所測樣本不一定是連續(xù),樣本命名顯得尤為重要。同時(shí)應(yīng)做到樣本名字文件與吸光度值文件保持一致,這樣若以后再調(diào)出吸光度文件時(shí),樣本名字文件可自動(dòng)同時(shí)調(diào)出;若大批量樣本時(shí)應(yīng)對不同微孔板編號區(qū)別(以文件后綴形式)。
2.樣板程序文件設(shè)定 一個(gè)實(shí)驗(yàn)室同一試驗(yàn)可能使用不同廠家試劑盒,但不同試劑盒規(guī)定的設(shè)定對照數(shù)量、閾值判定標(biāo)準(zhǔn)等均可能不一致,酶標(biāo)儀所設(shè)樣板程序也不一致。為了使用方便,可在樣板程序文件中用后綴加以區(qū)別。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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