差速傳代技術(shù)培養(yǎng)牙囊細(xì)胞
更新時間:2013-06-24 點擊次數(shù):1770次
現(xiàn)如今在口腔醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,盡管人們已經(jīng)能夠重新構(gòu)建牙冠結(jié)構(gòu),然而重新構(gòu)建結(jié)構(gòu)復(fù)雜的牙根始終是不少科研人員的*夢想。第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院文玲英教授等在一項國家自然科學(xué)基金資助課題中,培養(yǎng)出了純化的牙囊細(xì)胞,盡管這離重新構(gòu)建牙根還有很長的距離,但畢竟又向前邁了一步。
牙囊是牙胚的重要組成部分,隨著牙齒的發(fā)育,由它分化的細(xì)胞形成牙骨質(zhì)、牙周膜和部分牙槽骨,換句話說,由牙囊發(fā)育的組織結(jié)構(gòu)主要負(fù)責(zé)將牙齒固定在牙槽骨上。另外在牙齒萌出的過程中,牙囊細(xì)胞還可能通過對一些細(xì)胞和因子進(jìn)行調(diào)控,促進(jìn)牙齒的順利萌出。
牙囊細(xì)胞的重要功能吸引了研究者的目光,但要進(jìn)行深入的研究就需要首先分離出純化的牙囊細(xì)胞。早在上世紀(jì)90年代,國外就已經(jīng)開展了分離牙囊的研究,但由于牙囊與成釉器(上皮來源)“關(guān)系密切”,始終難以簡便地獲得純化的牙囊細(xì)胞。
據(jù)研究人員劉曉輝介紹,牙囊細(xì)胞和成釉器分別來源于外胚間充質(zhì)和口腔上皮,這兩類細(xì)胞在培養(yǎng)時對培養(yǎng)皿具有不同的黏附能力,當(dāng)使用胰酶消化時,黏附能力較差的牙囊細(xì)胞會首先掉下來,成釉器上皮細(xì)胞則要慢一些,這就是差速消化的概念。利用差速消化法,收集牙囊細(xì)胞并進(jìn)行傳代培養(yǎng),就稱為差速傳代技術(shù)。經(jīng)3~4次差速傳代,zui終就可以得到純化的牙囊細(xì)胞了。
在研究過程中,他們選用大鼠*和第二磨牙牙胚,剝離出牙囊和成釉器作混合培養(yǎng),經(jīng)3次差速傳代后,成功地從第4代牙胚原代細(xì)胞中獲得了純化的牙囊細(xì)胞。經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)及免疫化學(xué)染色檢測結(jié)果顯示純化率達(dá)100%,細(xì)胞生長狀態(tài)良好,增殖旺盛。
文教授說,差速傳代培養(yǎng)技術(shù)是一種很有效且操作簡單、廉價的研究方法,培養(yǎng)的高純化牙囊細(xì)胞為今后牙齒組織工程提供了種子細(xì)胞,下一步他們準(zhǔn)備將純化牙囊細(xì)胞應(yīng)用于牙根的重新構(gòu)建研究中。