【原理】
瓊脂糖(agarose)是經(jīng)過(guò)挑選,以質(zhì)地較純的瓊脂(agar)作為原料而制成的。瓊脂在化學(xué)上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復(fù)合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,它具有離子交換性質(zhì),這種性質(zhì)會(huì)給電泳及凝膠過(guò)濾以不良的影響。瓊脂糖是直鏈多糖,它由D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖的殘基交替排列組成。
瓊脂糖主要通過(guò)氫鍵而形成凝膠。電泳時(shí)因凝膠含水量大(98-99%),近似自由電泳,因?yàn)楣腆w支持物的影響少,故電泳速度快,區(qū)帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團(tuán),電滲影響很少,是一種較好的電泳材料,分離效果較好。
血清中脂類物質(zhì)與血清載脂蛋白結(jié)合成水溶性的脂蛋白(lipoprotein)形式存在。各種脂蛋白中所含載脂蛋白的種類及數(shù)量不同,各種脂蛋白顆粒大小也相差很大,因此,以瓊脂糖凝膠為支持物,在電場(chǎng)中可使各種脂蛋白顆粒分離開(kāi)來(lái)。
瓊脂糖凝膠電泳分離血清蛋白方法簡(jiǎn)單。將血清脂蛋白用脂類染料蘇丹黑(或油紅等)進(jìn)行預(yù)染。再將預(yù)染過(guò)的血清加樣于瓊脂糖凝膠板加樣槽中,通電后可以看到脂蛋白向正極移動(dòng),并分離出幾個(gè)區(qū)帶。
正常人血清脂蛋白可出現(xiàn)三條區(qū)帶,從陰極到陽(yáng)極依次為β-脂蛋白(zui深),前β-脂蛋白(zui淺)及α-脂蛋白(比前β-脂蛋白略深些),在原點(diǎn)處應(yīng)無(wú)乳糜微粒。有時(shí)前β-脂蛋白也顯
示不出來(lái)。
上海晶抗生物工程有限公司
地址:上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號(hào)9幢2441室
版權(quán)所有:上海晶抗生物工程有限公司 備案號(hào):滬ICP備16026504號(hào)-5 總訪問(wèn)量:532087 站點(diǎn)地圖 技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng) 管理登陸