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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本
更新時(shí)間:2015-01-23   點(diǎn)擊次數(shù):1220次

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本:血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、培養(yǎng)細(xì)胞、組織標(biāo)本。 
1. 血清: 
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2-8度保存3天。-20度保存一個(gè)月。 

2. 血漿: 
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2-8度保存3天。-20度保存一個(gè)月。 

3. 尿液、胸腹水、腦脊液: 
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2-8度保存3天。-20度保存一個(gè)月。 

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清: 
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。2-8度保存3天。-20度保存一個(gè)月。 

5. 培養(yǎng)細(xì)胞 
    檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2-8度保存3天。-20度保存一個(gè)月。 

6. 組織標(biāo)本 
    切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的0.1mol/L的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,2-8度保存3天。-20度保存一個(gè)月。(一定的量通常實(shí)驗(yàn)室指1g重的組織加入5ml的0.1mol/L的PBS,PH7.4的緩沖液。 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化標(biāo)本的時(shí)間以*勻化標(biāo)本為止,具體時(shí)間以實(shí)驗(yàn)的標(biāo)來定。)

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