血管內(nèi)皮細胞對維持血管動態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調(diào)節(jié)因子。
內(nèi)皮細胞還釋放控制細胞增殖和調(diào)節(jié)血管壁緊張度的分子。這些過程都可以用培養(yǎng)的細胞進行體外研究,人臍靜脈和動脈內(nèi)皮細胞是這類研究中常用的細胞類型。
除了普通的內(nèi)皮細胞特征例如“鵝卵石狀”,VIII因子陽性著色,能攝取乙?;兔芏戎鞍?,人臍血管內(nèi)皮細CD31染色陽性。用IL-1或TNF-α預先處理過的細胞也能選擇性地表達E-selectin和VCAM。
人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)提取于人臍帶靜脈組織,原代凍存。每管含有細胞數(shù)>5×105 cells/ml,此細胞通過vWF/Factor VIII 和CD31 (P-CAM)免疫熒光染色驗證,經(jīng)測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。細胞可以達到15倍增。 那么我們在收到人臍靜脈內(nèi)皮細胞之后有哪些需要注意的呢?
1.收到細胞后,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否全揮發(fā),細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
3.由于運輸?shù)脑?,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。