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該如何使用大鼠肝星形細(xì)胞看完本篇你就知道了
更新時間:2022-02-14   點擊次數(shù):806次
  大鼠肝星形細(xì)胞分離自正常大鼠肝臟組織,呈葡萄串狀。肝星形細(xì)胞是肝臟*的間充質(zhì)細(xì)胞,約占肝臟細(xì)胞總數(shù)的8%~13%。
 
  作為肝臟合成細(xì)胞外基質(zhì)的主要細(xì)胞群,肝星形細(xì)胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結(jié)構(gòu),還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環(huán)調(diào)節(jié)。
 
  此外,肝星形細(xì)胞能通過合成肝細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和肝再生。
 
  大鼠肝星形細(xì)胞使用方法:
 
  收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
 
  1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
 
  2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 
  3. 細(xì)胞傳代
 
  1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
 
  2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
 
  3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
 
  4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
 
  大鼠肝星形細(xì)胞注意事項:
 
  1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月
 
  2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作
 
  3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)
 
  4. 建議收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài)。
 
  5. 該細(xì)胞只可用于科研
 
  備注:由于實驗所用試劑與操作環(huán)境的不同,以上方法供各實驗室參考。
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