各種細菌所具有的酶系統(tǒng)不盡相同,對營養(yǎng)基質(zhì)的分解能力也不一樣,因而代謝產(chǎn)物存在差別。以此用生理生化試驗的方法檢測細菌對各種基質(zhì)的代謝作用及其代謝產(chǎn)物,從而鑒別細菌的種屬,稱之為細菌的生理生化反應,上海滬鼎生物為您介紹幾種細菌鑒定中常見的生理生化反應原理:
1.糖(醇)類發(fā)酵試驗
不同的細菌含有發(fā)酵不同的糖(醇)的酶,因而發(fā)酵糖(醇)的能力各不相同,產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不同:有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣,有的產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。指示劑溴甲酚紫,pH5.2—pH6.8紫色,當發(fā)酵產(chǎn)酸時,培養(yǎng)基將由紫變黃。產(chǎn)氣可由杜氏小管中有無氣泡來證明。
2.甲基紅試驗(M.R試驗)
甲基紅試驗,pH4.4紅色~pH6.2,是用來檢測由葡萄糖產(chǎn)生的有機酸,如甲酸、乙酸、乳酸等。有些細菌分解糖類產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸進一步反應形成甲酸、乙酸、乳酸等,使培養(yǎng)基的pH降低到4.2以下。有些細菌在培養(yǎng)的早期產(chǎn)生有機酸,但在后期將有有機酸轉(zhuǎn)化為非酸性末端產(chǎn)物,如乙醇、丙酮酸等,使pH升至大約6。
4.靛基質(zhì)試驗
某些細菌,如大腸桿菌,能產(chǎn)生色氨酸酶,分解蛋白胨中的色氨酸,產(chǎn)生靛基質(zhì),靛基質(zhì)與對二甲基氨基苯甲酸結(jié)合,形成玫瑰色靛基質(zhì)。
5.硫化氫試驗
某些細菌能分解含硫的氨基酸,產(chǎn)生硫化氫,硫化氫與培養(yǎng)基中的鐵鹽反應,形成黑色的硫化鐵沉淀,為硫化氫試驗陽性。
6.明膠液化實驗
明膠在25度以下可維持凝膠狀態(tài),以固體狀態(tài)存在,而在25度以上時明膠就會液化。有些微生物可產(chǎn)生一種成為明膠酶的胞外酶,水解這種蛋白質(zhì),而使明膠液化,甚至在4度仍能保持液化狀態(tài)。
7.檸檬酸鹽利用試驗
有的細菌如產(chǎn)氣桿菌,能利用檸檬酸鈉為碳源,因此能在檸檬酸鹽培養(yǎng)基上生長,并分解檸檬酸鹽后產(chǎn)生碳酸鹽,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性。此時培養(yǎng)基中的溴麝香草酚藍指示劑pH6.0(黃)~7.6(藍),由綠色變?yōu)樯钏{色。
8.淀粉水解實驗
細菌水解淀粉的過程可以通過底物的變化來證明,即用dian測定不再產(chǎn)生藍色。
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