ELISA試劑盒的其操作程序
更新時(shí)間:2016-06-15 點(diǎn)擊次數(shù):1073次
因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善,重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,ELISA試劑盒靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時(shí)),以增加其吸附性能。
例如,在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí),需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。換言之,包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。ELISA試劑盒當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí),抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被,其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。
假如測(cè)定出樣品中無機(jī)氯為2.98mg/L,則以為回收率為98%。因?yàn)槠湓噭┎粊y、易保留,操縱簡(jiǎn)便,結(jié)果判定較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢修的各領(lǐng)域中。即檢出值與實(shí)際值的比值,ELISA試劑盒回收率就是用于檢測(cè)的試劑盒回收率,對(duì)于定量檢測(cè)來說,主要仍是一個(gè)正確度的驗(yàn)證。