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ELISA試劑盒質(zhì)量有差異如何解決
更新時(shí)間:2016-06-12   點(diǎn)擊次數(shù):1212次

其次要考慮的是R&D Systems的免疫測(cè)試方法測(cè)量的蛋白水平是用一種抗體捕獲的、用第二種抗體測(cè)定的,這種測(cè)定是在ELISA試劑盒研發(fā)時(shí)與標(biāo)準(zhǔn)蛋白校正過的。

間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;

2.次日洗滌3次;

3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌;

4.(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,ELISA試劑盒加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml;

5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;

6.’zui后一遍用DDW洗滌。

7. 加底物液顯色:ELISA試劑盒于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

8. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

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